化學(xué)發(fā)光免疫法與放射免疫法檢測(cè)AFP的比較
日期：2013-08-15
羅煒（廣州呼吸病研究所）
王慧 陳柏銘（廣州醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科）
摘要 本文采用放射免疫法和化學(xué)發(fā)光免疫法平行測(cè)定60例臨床送檢血清標(biāo)本的甲胎蛋白(AFP)含量，結(jié)果表明兩法的相關(guān)性良好(r＝0.995)，但化學(xué)發(fā)光免疫法的精密度和準(zhǔn)確性均優(yōu)于放射免疫法。
關(guān)鍵詞 化學(xué)發(fā)光免疫法 放射免疫法 甲胎蛋白
臨床檢測(cè)血清AFP常規(guī)多采用放射免疫法，而近年發(fā)展起來的化學(xué)發(fā)光免疫法因其快速、精確、重現(xiàn)性好及試劑安全無毒的特點(diǎn)，顯示出很好的應(yīng)用前景［1］。為進(jìn)一步了解化學(xué)發(fā)光免疫法的特點(diǎn)，本文報(bào)告用放射免疫法和化學(xué)發(fā)光免疫法對(duì)比檢測(cè)60例臨床血清標(biāo)本中AFP的含量，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和比較。
材料和方法
一、標(biāo)本 隨機(jī)抽取60例臨床送檢血清標(biāo)本。
二、儀器和方法 放射免疫法使用上海的SN-682型γ計(jì)數(shù)儀，中國原子能科學(xué)研究所的AFP試劑盒?；瘜W(xué)發(fā)光免疫法使用美國Chiron公司的ACS180全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀和配套試劑盒。其測(cè)定原理為以吖啶酯作為發(fā)光底物，采用雙抗體夾心模式［2］，即標(biāo)本中的AFP抗原與固相中的單克隆AFP抗體結(jié)合，再與液相中以吖啶酯標(biāo)記的多克隆AFP抗體結(jié)合。因待測(cè)AFP抗原總量與儀器測(cè)得的發(fā)光單位量(RLUs)存在正比的關(guān)系，由此求出AFP的含量。
結(jié) 果
一、線性實(shí)驗(yàn) 將標(biāo)準(zhǔn)液按不同的濃度稀釋后做線性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示放射免疫法和化學(xué)發(fā)光免疫法分別在5～400 ng/ml和2～940 ng/ml范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。
二、對(duì)比實(shí)驗(yàn) 用上述兩法同時(shí)對(duì)受檢血清標(biāo)本進(jìn)行定量分析。結(jié)果表明，兩法無顯著差異(P＞0.05)，相關(guān)系數(shù)r＝0.995，直線回歸方程Y＝-1.058+0.920X，提示兩法呈良好相關(guān)性。
三、回收實(shí)驗(yàn) 取不同濃度的混合血清(AFP濃度為18.6，26.7，35.3 ng/ml)，分別加入不同濃度的定值血清，用放射免疫法和化學(xué)發(fā)光免疫法測(cè)得的回收率分別為90.2～109.0%和91.0～107.3%，平均回收率為95.7%和96.4%。
四、精密度實(shí)驗(yàn) 用兩法對(duì)低、中、高值質(zhì)控品分別進(jìn)行精密度實(shí)驗(yàn)。附表中的結(jié)果表明化學(xué)發(fā)光免疫法的重復(fù)性較好。
附表 兩法的精密度對(duì)比
批內(nèi)CV% 批間CV%
放射免疫法 化學(xué)發(fā)光免疫法 放射免疫法 化學(xué)發(fā)光免疫法
低值 5.27 3.20 6.55 3.40
中值 5.00 2.48 5.30 3.31
高值 4.50 3.50 5.38 4.71
討 論
化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)既具有發(fā)光檢測(cè)的高度敏感性，又具有免疫分析的高度特異性［3］。本文檢測(cè)AFP結(jié)果提示放射免疫法和化學(xué)發(fā)光免疫法之間無顯著差異(P＞0.05)，相關(guān)性好(r＝0.995)。顯示化學(xué)發(fā)光免疫法在敏感性、特異性方面不僅可與放射免疫法相媲美，而且化學(xué)發(fā)光免疫法的準(zhǔn)確性、精密度和試劑盒的有效期等方面均優(yōu)于放射免疫法。由于化學(xué)發(fā)光免疫法是以化學(xué)發(fā)光劑作為標(biāo)記物進(jìn)行定量檢測(cè)，所以其試劑具有穩(wěn)定和無毒性的優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)使用的全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀可以直接對(duì)血清標(biāo)本進(jìn)行采樣，處理和檢測(cè)，標(biāo)本可以隨到隨測(cè)，短時(shí)間內(nèi)出結(jié)果，較放免法大大縮短了時(shí)間，能充分滿足臨床的需要。因此本文認(rèn)為，化學(xué)發(fā)光免疫法可廣泛應(yīng)用于臨床項(xiàng)目的檢測(cè)。
參考文獻(xiàn)
［1］陶義訓(xùn)主編．免疫學(xué)和免疫學(xué)檢驗(yàn)．第二版．北京：人民衛(wèi)生出版社，1997∶174
［2］章谷生.發(fā)光分析和發(fā)光免疫技術(shù)．余傳霖等主編．現(xiàn)代醫(yī)學(xué)免疫學(xué)．上海：上海醫(yī)科大學(xué)出版社，1999∶716
［3］張麗民．化學(xué)發(fā)光標(biāo)記及發(fā)光免疫分析．基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床.1995；15(4)∶247
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